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ELISA常見問題

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  • TA的每日心情
    郁悶
    2024-9-18 08:22
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    [LV.1]初來乍到

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    1. 產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格?可檢測多少個樣本?
      產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。
      每次實驗的標準曲線一般設(shè)7個不同濃度,加上空白孔,標準曲線一共需要8個孔。因此,一個48T試劑盒zui多可以測定40個樣本(不做重復(fù)且一次用完),一個96T試劑盒zui多可以測定88個樣本(不做重復(fù)且一次用完)??梢愿鶕?jù)實際樣本數(shù)量和實驗計劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。
      2.48T和96T的試劑盒有哪些不同?
      48T和96T的試劑盒,每個孔的反應(yīng)體系都是一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格,詳見說明書。
      3. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何?
      產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過嚴格的穩(wěn)定測試,發(fā)貨前亦須通過檢測并提供質(zhì)檢報告,在市場上深受廣大客戶的贊許!
      4.貴公司有沒有酶活性檢測的試劑盒?
      酶活力的測定實際上就是測定酶促反應(yīng)的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來表示,單位是U/g或U/ml。酶活力的測定方法:⑴測定完成一定量反應(yīng)所需的時間,⑵測定單位時間內(nèi)酶催化化學(xué)反應(yīng)量。主要通過產(chǎn)物的增加量或底物的減少量來測定。常用的方法有:⑴分光光度法,⑵熒光法,⑶同位素測定法,⑷電化學(xué)法。
      ELISA的方法一般是對可溶性抗原或抗體進行定性和定量的檢測,所以酶活性是不能用ELISA來檢測的。
      5.一次ELISA實驗需要多長時間?
      雙抗體夾心ELISA法一次實驗需要4-4.5小時,競爭ELISA法一次實驗需要2-2.5小時。
      6.血清樣本如何處理?
      全血標本于室溫放置2小時或4℃過后于1000×g離心20分鐘。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
      7. 血漿樣本如何處理?
      應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
      8. 尿液樣本如何處理?
      用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
      9.細胞上清液樣本如何處理?
      檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
      10. 組織樣本如何處理?
      用預(yù)冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢測。
      11.為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法?
      小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以采用競爭法。其原理是標本中的抗原和固相載體上的抗原競爭化抗體上的結(jié)合位點,標本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的化抗體愈少,zui后的顯色也愈淺,即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。
      12.用什么軟件處理ELISA檢測的數(shù)據(jù)比較好?
      ELISA標準曲線擬合可以應(yīng)用Curve Expert軟件進行數(shù)據(jù)分析。它使用非常方便,可以生成漂亮的曲線應(yīng)用到論文之中。軟件可以在下載中心進行下載。
      13. 試劑盒做的結(jié)果不理想怎么辦?
      實驗結(jié)果不理想請及時與客服或,我們可以幫您一起分析實驗結(jié)果。如果僅憑實驗數(shù)據(jù)無法判斷,您可以將試劑盒發(fā)回給我們進行售后檢測。如果是試劑盒本身的質(zhì)量問題,可以為您退換貨;如果是實驗操作的問題,技術(shù)人員可以給您一些改進的建議。
      Anti-IGF-1 R (Insulin-like Growth Factor-I Receptor) 胰島素樣生長因子-I受體抗體 Anti-IGF-1R (Insulin-like Growth Factor-I Receptor)hu、dog、chi、mo、rat 胰島素樣生長因子-I受體抗體 Anti-IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2抗體 Anti-IGFBP-5/IBP5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5) 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5抗體 Anti-IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I抗體 Anti-IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長因子-II抗體 IGF-IIBP3(Insulinlike growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 Anti-IKB β (Inhibitor of K B) KB抑制蛋白抗體 Anti-IKB α (Inhibitor of KBα) KB抑制蛋白α抗體 Anti-IKI3 family protein 擬南芥IKI3抗體 Anti-IL-10(Interleukin-10) 白介素10抗體 anti-IL-12(Interleukin-12) 白介素12抗體(白細胞介素-12) Anti-IL-13(Interleukin-13) 白介素13抗體 anti-IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白細胞介素-16抗體 Anti-IL-17(Interleukin-17) 白介素-17抗體 Anti-IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白細胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體 Anti-IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體 Anti-IL-1α (Interleukin-1α ) 白介素1α抗體 Anti-IL-1β(Interleukin-1β) 白介素1β抗體 Anti-IL-2 (Interleukin-2) 白介素2抗體 Anti-IL-2(Mouse to Humen Interleukin-2) 鼠抗人白細胞介素-2抗體(單抗) Anti-IL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗體 Anti-IL-4(Interleukin-4) 白介素4抗體 Anti-IL-6 (Interleukin-6) Human 白介素6 Anti-IL-6 (Interleukin-6) mouse、rat 白介素6抗體 Anti-IL-6(Interleukin-6/interferon, beta 2)mouse rat 白介素6抗體 Anti-IL-8(Interleukin-8)rat mouse 白介素8抗體 Anti-ILK-1 (Integrin-linked protein kinase 1) 整合素連接激酶-1抗體 anti-ING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生長抑制因子基因1抗體 Anti-Inhibin α 抑制素α抗體 Anti-Insulin 胰島素抗體 Anti-Insulin Receptor-α(ISR-α) 胰島素受體-α抗體 Anti-Insulin(1-51 protein) 胰島素1-51蛋白抗體 Anti-Integrin α3β1 整合素α3β1抗體 Anti-Integrin α4β7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7) 整合素α4β7抗體 anti-Integrin avb3 整合素avb3抗體 Anti-Integrin αE2/CD103 整合素αE2抗體 Anti-IQGAP1 支架蛋白抗體 Anti-IRS P53 (Insulin receptor suRCtrate P53) 胰島素受體底物p53蛋白抗體 Anti-IRS-1 胰島素受體底物-1抗體 Anti-IRS-2 胰島素受體底物-2抗體 Anti-IRS-3 胰島素受體底物-3抗體 Anti-IRS-4 胰島素受體底物-4抗體 Anti-ISR(Insulin Receptor) 胰島素受體抗體 Anti-ISR-α (Insulin Receptor-α) 胰島素受體-α抗體 Anti-ISR-β (Insulin Receptor-β) 胰島素受體-β抗體 Anti-ITG-α/ CD49d 整合素α4抗體 Anti-ITG-β1/CD29(integrin β1) 粘附分子整合素β1抗體 Anti-ITG-α5/CD49e(Integrin α5) 粘附分子整合素α5抗體 Anti-ITG-β3/CD61(Integrin β chain,β3 precursor) 整合素-β3抗體 Anti-JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) c-Jun氨基末端激酶1/3抗體 Anti-KATPC (ATP-Sensitive K+ Channel Subunits uKATP-1—ATP) ATP敏感性鉀通道蛋白抗體 Anti-Ki-67 Ki-67 Antigen抗體 Anti-Kiss-1 (Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體 Anti-Klf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白抗體 Anti-KLH 血藍蛋白抗體 Anti-κOR (kappa Opioid receptor) kappa型阿片受體抗體 Anti-K-ras 原癌基因K-ras抗體 Anti-Laminin alpha5 層粘蛋白α5抗體 Anti-L-Citrulline (Rabbit Anti-L-Citrulline) 抗L-瓜氨酸抗體 Anti-LDL-R (Low-density lipoprotein receptor precursor) 低密度脂蛋白受體抗體 Anti-Leptin 瘦素抗體 Anti-Leptin 瘦素抗體 Anti-Leptin receptor 瘦素受體抗體 Anti-Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長) Anti-Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長)
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